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ELISA IgM-Anti-ß2-GP

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Enzymimmunoassay (ELISA) zur semi-quantitativen Bestimmung von IgM anti-Beta 2 Glykoprotein l (β2GPl) Antikörpern in Humanserum oder zitriertem Plasma (3,2% Natriumzitrat).

Testprinzip

Der Test wird als indirekter ELISA durchgeführt. Verdünnte Serum- oder Plasmaproben, Kalibratorseren und Kontrollen werden in mit gereinigtem humanem β2GPl beschichteten Mikrovertiefungen inkubiert. Durch die Inkubation können die in den Proben vorhandenen Anti-β2GPl-Antikörper mit dem immobilisierten Antigen reagieren. Nach der Entfernung ungebundener Serum- oder Plasmaproteine durch Waschen werden mit Meerrettichperoxidase (HRP) markierte, für humanes IgM spezifische Antikörper zugegeben, die mit den gebundenen β2GPl-Antikörpern Komplexe bilden. Nach einem weiteren Waschschritt wird das gebundene Enzym-Antikörper-Konjugat durch Zugabe einer einzigen Lösung, die Tetramethylbenzidin (TMB) und Wasserstoffperoxid (H2O2) als chromogenes Substrat enthält, untersucht. In den Vertiefungen entwickelt sich eine Farbe, deren Intensität proportional zur Serumkonzentration der Anti-β2GPl-Antikörper ist. Die Ergebnisse werden durch Ablesen der optischen Dichte (Absorption) jeder Vertiefung in einem Spektralphotometer ermittelt. Es werden Kalibrierseren mit den IgM-β2GPl-Antikörperkonzentrationen in M-Einheiten mitgeliefert. Für die Mehrpunktkalibrierung führen Sie eine lineare Regressionsanalyse mit den Kalibratorwerten gegen die Kalibrator-O.D.s durch. Kontrollen und Patientenergebnisse werden anhand der Kalibrierungskurve bestimmt.

Reagenzien und Haltbarkeit (nach Öffnung)

Die Reagenzien sind bei 2-8°C bis zum angegebenen Verfallsdatum haltbar. Nicht einfrieren!

ReagenzMenge
Mikrotiterstreifen (12 x 8), beschichtet2 Stück
Probenverdünner IV (blau-grüne-Lösung)2 x 60 mL
IgM-β2GPl-Kalibratorserum (H, M, N)3 x 0,6 mL
IgM-β2GPl-Kontrollserum, positiv1 x 0,6 mL
Kontrollserum, normal1 x 0,6 mL
Anti-human-IgM- Ziegen-Antikörper-Lösung,1 x 30 mL

HRP-konjugiert (rote Lösung)

ReagenzMenge
Einkomponenten- Substrat (TMB/H2O2)1 x 30 mL
Stopplösung (0,36 N Schwefelsäure)1 x 30 mL
Waschkonzentrat (33X PBS/Tween)2 x 30 mL
Anzahl der BestimmungenArtikelnummer
2 x 9613371

Datum: 30.06.2014

© Haemochrom Diagnostica GmbH

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